2019年9月13日，美國FDA發(fā)布公告稱，多個品牌生產(chǎn)的雷尼替丁中含有低濃度的可能致癌物 N-亞硝基二甲胺(NDMA)，該物質(zhì)一般存在于水和食物中，在很低濃度時即可造成人體遺傳物質(zhì)的損傷，具有致癌、致突變的特點。NDMA分子量小，親水性強，對檢測方法要求更加嚴(yán)格。

        雷尼替丁，組胺H2受體拮抗劑，主要用于胃酸過多、燒心等的ZL，也是目前比較主流的ZL潰瘍病的藥品。在雷尼替丁中檢測出NDMA可能會對用藥安全性產(chǎn)生較大威脅，因此在藥物中準(zhǔn)確監(jiān)測NDMA非常重要。

        針對此次“雷尼替丁”事件，迪馬科技結(jié)合ZG食品藥品檢定研究院發(fā)布的《關(guān)于開展雷尼替丁中N-亞硝基二甲胺檢驗工作的通知》及FDA 10/17/2019公布Zxin檢測方案，建立了超GX液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜—鹽酸雷尼替丁中NDMA的檢測方法，本方法用于測定雷尼替丁藥物產(chǎn)品和原料藥中NDMA的含量，可供廣大分析工作者參考。

        以下為詳細(xì)解決方案，敬請參考！

1、適用范圍
        本方案適用于鹽酸雷尼替丁中N-亞硝基二甲胺（NDMA）的檢測。

2、標(biāo)準(zhǔn)品配制
(1) N-亞硝基二甲胺（NDMA）儲備液1.0 μg/mL：準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配制成1.0 μg/mL的儲備液；
(2) 對照品溶液2.0 ng/mL：吸取適量儲備液，用水配制成2.0 ng/mL對照品溶液；
(3) 靈敏度溶液1.0 ng/mL：吸取適量儲備液，用水配制成1.0 ng/mL靈敏度溶液。

3、樣品制備
(1) 鹽酸雷尼替丁供試品溶液制備
    取供試品約300 mg，精密稱量于10 mL容量瓶中，用水定容至10 mL。

(2) 鹽酸雷尼替丁膠囊供試品溶液制備
取本品內(nèi)容物適量（約相當(dāng)于雷尼替丁300 mg）于15 mL離心管中，準(zhǔn)確加入10 mL水，振蕩40 min，6000 rpm離心2 min，取上清液過微孔濾后上機分析。
(3) 鹽酸雷尼替丁片供試品溶液制備
取本品5片，精密稱量，研細(xì)，準(zhǔn)確稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于雷尼替丁300 mg）于15 mL離心管中，加入10 mL水，振蕩40 min，6000 rpm離心2 min，取上清液過微孔濾膜后上機分析。

4、分析條件
UPLC 條件
色譜柱：Spursil C18, 100 x 3.0 mm, 3.0 μm (Cat#：82022)
流  速：0.7 mL/min   
進(jìn)樣量：10 μL  
柱  溫：30 ℃
流動相：A: 0.1%甲酸水    B: 0.1%甲酸甲醇
梯度設(shè)置

質(zhì)譜條件

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

5、實驗結(jié)果

(1) 重復(fù)性實驗結(jié)果
對照品溶液2.0 ng/mL重復(fù)進(jìn)樣6次結(jié)果如下

對照品溶液重現(xiàn)性數(shù)據(jù)總結(jié)

6針NDMA 2.0 ng/mL的XIC對比圖

(2) 靈敏度實驗
系統(tǒng)適用性靈敏度溶液1.0 ng/mL NDMA主峰信噪比＞3。

NDMA 1.0 ng/mL XIC圖

(3) 標(biāo)準(zhǔn)曲線
    用純水逐級稀釋NDMA儲備液，配制成1.0 ng/mL，2.0 ng/mL，5.0 ng/mL，10.0 ng/mL，50.0 ng/mL，100.0 ng/mL，500.0 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。將標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣，以峰面積對濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，在線性范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)0.9998。

NDMA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

(4) 加標(biāo)回收實驗
    取適量膠囊樣品（約相當(dāng)于雷尼替丁300 mg），加入適量NDMA標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照鹽酸雷尼替丁膠囊供試品溶液制備方法進(jìn)行實驗。

鹽酸雷尼替丁膠囊中NDMA檢測的添加回收結(jié)果（%）

(5) 陽性樣品實驗
    取適量樣品（約相當(dāng)于雷尼替丁300 mg），按照鹽酸雷尼替丁膠囊供試品溶液制備方法進(jìn)行實驗。空白實驗是樣品不取，直接加入水振蕩提取，然后上機。

鹽酸雷尼替丁膠囊中NDMA檢測結(jié)果

鹽酸雷尼替丁膠囊中NDMA檢測XIC圖 

(6) NDMA和雷尼替丁分離度驗證實驗
       由于雷尼替丁保留較差，普通色譜柱上容易和NDMA共洗脫，把含有NDMA和雷尼替丁的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液直接上機，本方法可將兩個化合物完全分離。

NDMA和雷尼替丁混標(biāo)TIC圖（RT1.51  NDMA ，RT2.86  雷尼替丁）

NDMA XIC圖

雷尼替丁 XIC圖

雷尼替丁中N-亞硝基二甲胺(NDMA)的檢測相關(guān)產(chǎn)品信息：

紅色貨號產(chǎn)品火熱促銷中

（來源：北京迪科馬科技有限公司）