?  什么是活細胞成像？  

活細胞成像(live cell imaging)統稱為捕捉活的、活動狀態的細胞圖像的技術，這些細胞圖像可以是單個靜態圖像，也可以是延時系列圖像。相應地，活細胞成像的應用可以分為兩大類：

? 細胞在自然狀態下的圖像記錄。

? 實時觀察和記錄細胞、組織或整個生物體的動態過程。

?  觀察分析活細胞時面臨的挑戰  

? 在相對較短的時間內采集大量信息。

? 要保持細胞保存在可調節培養環境氣體濃度和溫度（在很多情況下）的培養室中。

? 激發光源會損害活細胞。

? 細胞焦面漂移，無法聚焦。

? 需要使用配備有軟件或硬件控制自動對焦的成像儀器來避免這種情況。

Revolution全自動顯微鏡成像系統

Revolution全自動顯微鏡成像系統部件高度集成內置，節省空間，避免繁瑣調試及維護；觸屏式操控觀察工作站，界面直觀簡潔，易于學習，方便使用。Revolution全自動顯微鏡成像系統的光源采用高能LED光源，自動熒光切換把光毒降低。

▌智能化全自動多功能系統：

? TimeLapse延時攝影：可以根據設定在特定時間內完成特定間隔時間和特定的拍照張數。

? 獨有的Hyperscan快速成像：30幀高速成像，可以在幾秒鐘內完成上百張照片的采集。

? Multi-well Point孔板導航成像：不限定孔位大小，只需輸入參數就可以自動完成多孔或單孔采集。

? Focus Map自定義多點聚焦：可以自動完成不同層面的自動聚焦。

? Z-Stacking多層掃描大景深成像：完成多層面大景深成像。

? DHR智能實時數字化降噪：實時完成反卷積計算，得到清晰圖像。

▌ECHO INCUBATOR為活細胞觀察提供一個穩定而靈活的培養環境

ECHO INCUBATOR采用緊湊的一體式設計，方便用戶快速安裝和拆卸。箱體結構透明和大型前置開門設計，可為用戶提供清晰的觀察視野并方便操作樣本。采用無風扇對流加熱和循環熱空氣方案，在消除振動的同時并可防止外部灰塵進入您的樣品和儀器光學元件。提供穩定的細胞生長環境，確保適合的細胞培養條件，使細胞處于zuijia生長狀態。

　　細胞生物學是生命科學的一門學科。顧名思義，它致力于研究生物。單憑這一事實就足以成為研究細胞自然生存狀態的理由。當然，活細胞成像還有其他深層次的原因。在本篇文章中，我們列舉了用延時顯微鏡研究活細胞是有意義的五大很好的理由。

　　背景

　　活細胞成像允許在一定時間內在顯微鏡下對細胞進行體內觀察。各種顯微鏡技術適用于活細胞成像：例如，可以采用無標記的技術，如相差，DIC，或干涉測量法，也可以依靠熒光顯微鏡，利用熒光標記標記和可視化細胞亞結構、分子或蛋白質。當然，活細胞成像也面臨挑戰，在建立活細胞圖像實驗時需要考慮某些要求。最重要的是，必須確保顯微鏡配備了一個stage top 培養箱，能夠提供理想的環境，使細胞在一段時間內保持存活和健康。

圖1.A：活細胞成像過程中需要考慮和控制的環境參數

圖1.B：倒置顯微鏡的臺頂培養箱示意圖

　　參數和環境條件是此類實驗的重要部分，我們將在以后的公眾號中討論。如果您有興趣，可以在本篇文章中查看更多相關內容。在此我們已經介紹了基本知識，接下來我們將繼續深入探討為什么您應該使用活細胞成像來研究您的細胞：

　　1.避免固定過程中的人工制品

　　細胞通常在顯微鏡觀察前固定（如免疫熒光），以保存在逼真的狀態。多年來，許多不同的化學和物理程序已被優化和建立，以保持原始樣品的質量。然而，固定過程會對細胞造成損害（當然在這個過程之后，它們會死亡），并不可逆轉地改變其組織、結構和形態（細胞器收縮、蛋白質定位錯誤等）。然而，活細胞成像可以讓我們研究活細胞。這意味著他們應該展示他們的自然形態，這仍然會受到熒光標簽、激光等的影響，但這就像環境條件一樣，是一個不同的狀況。

　　2.觀察和分析動態過程

　　活細胞成像使我們能夠觀察整個細胞群、單個細胞甚至亞細胞水平的動態事件。當固定細胞將其鎖定在特定時間點的特定（行為或結構）狀態時，對活細胞的顯微鏡觀察可以洞察整個動態過程。基于功能性細胞的檢測，如損傷和遷移（圖2）或趨化實驗是活細胞成像應用的很好的例子。這些分析使得研究細胞對化學（趨化性）或機械（傷口愈合）刺激的反應成為可能。

圖2：使用ibidi Stage Top孵育系統的活細胞成像顯示了傷口愈合和遷移試驗中MCF7細胞的間隙閉合。相差；10倍物鏡。

　　3.實時跟蹤細胞變化

　　活細胞顯微鏡是實時了解細胞隨時空變化的一種有價值的方法，而不是依賴于固定細胞的端點的分析結果。通過使用延時視頻顯微鏡對細胞進行更長時間的跟蹤，可以捕捉到結構重排的動態(如圖3，感受趨化刺激后細胞骨架的極化), 或使用固定細胞可能會錯過的瞬時細胞性活動(如，有絲分裂期間的染色體分離)。

圖3：應用趨化梯度后，表達LifeAct的原代樹突狀小鼠細胞中肌動蛋白動力學的活細胞成像

　　4. 研究單分子動力學、定位和相互作用

　　先進熒光標記和成像技術的發展，如光脫色熒光恢復技術（FRAP）、熒光壽命成像顯微技術（FLIM）和熒光共振能量轉移技術（FRET），使活細胞成像過程中單分子定位、動力學和相互作用的觀察和分析成為可能。

　　FRAP可以測量活細胞內熒光標記分子和蛋白質的遷移率。FLIM通過測量附著的熒光團的壽命來提供有關細胞分子分布及其環境的信息。

　　利用FRET，人們可以通過檢測兩個分子在納米級相互接近時所附熒光團的相互作用來測量活細胞中兩個分子的直接相互作用。

　　5. 從單個實驗中獲取更多信息

　　總的來說，如果您進行活細胞成像，您可以從單個實驗中獲得比從固定細胞成像更多的信息。這是因為活細胞成像使人們能夠跟蹤分子動力學和動力學，并提供了您感興趣的一個更大、更全面的細胞過程圖像。

　　對固定樣本的分析通常只提供某個細胞性活動的快照，而跟蹤整個動態過程使人們能夠從單個實驗中測量更多參數，并得出更多不同的結論。

　　如您有興趣了解更多關于活細胞成像的知識，請關注我們公眾號活細胞成像應用相關內容。也可以向我們索要相關資料。

　　活細胞成像應用相關內容：

利用微流控技術在微流控芯片通道內進行實時的細胞培養對很多生物學、醫學等領域的工作人員來講是一個重大的挑戰和機會，通過該技術可以大規模的降低實驗耗材消耗，提高實驗轉化效率，模擬實際生物環境下的細胞生長行為等。在科學研究和工業應用中，活細胞成像的細胞培養都具有較大的應用前途，那么現在有沒有一款或一套合適的儀器來做細胞培養實驗呢？答案是有的，Elveflow微流控灌注套裝（Perfusion Pack）結合ALine公司的Microslides便可以完成細胞培養實驗。

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在許多細胞生物學實驗室中，活細胞成像是一種理想的分析工具。現有的活細胞成像主要依賴昂貴的、難以操作的大型設備。而明美新研發的一款活細胞成像儀，小巧輕便，適合放在超凈工作臺。

活細胞成像儀是一臺適合小規模細胞培養的小巧輕便成像設備，它采用WiFi相機無線連接，可以適配電腦、手機、平板等多種終端設備，標配明場和相差兩種觀察方式，可選三通道LED熒光實現熒光觀察，可選電動XYZ三軸實現自動對焦，可選3個物鏡實現不同觀察需要。

活細胞成像儀作為智能活細胞動態成像監測設備，能夠幫助您優化日常細胞培養工作并將成像結果標準化，改善下游實驗流程。

活細胞成像儀可用于數據存儲和圖像分析，您可以在平板電腦實時地訪問實驗數據和查看細胞培養。

來源：https://www.mshot.com/article/1363.html

干涉顯微鏡能看到活細胞嗎？這一問題在生物學和細胞學研究中有著廣泛的關注。干涉顯微鏡作為一種先進的光學成像技術，其高分辨率和非侵入性特點使其在生物學、醫學和材料科學等領域得到廣泛應用。本文將探討干涉顯微鏡在觀察活細胞方面的能力，分析其工作原理、優點與局限性，并討論該技術在細胞生物學研究中的實際應用。通過對這一問題的深度解析，讀者將對干涉顯微鏡在活細胞觀察中的應用有更清晰的理解。

什么是干涉顯微鏡？

干涉顯微鏡是一種通過干涉效應增強樣品對比度的顯微鏡。與傳統的光學顯微鏡不同，干涉顯微鏡利用相干光源生成干涉圖樣，從而能更清晰地呈現細胞結構及其動態過程。它能夠在不使用染料和標記物的情況下，通過相位對比增強細胞內細微結構的可視化效果。這種技術特別適合觀察生物樣品，尤其是活細胞，因為它不會對細胞造成損傷。

干涉顯微鏡對活細胞的觀察能力

干涉顯微鏡的優勢之一是能夠觀察到活細胞的微觀動態變化，而無需對細胞進行染色或其他干擾性處理。這使得研究者可以更真實地捕捉到細胞在不同生理狀態下的行為。例如，通過干涉顯微鏡，科學家可以觀察到活細胞內的細胞器、細胞分裂、細胞遷移等過程，而這些在傳統顯微鏡下很難清晰呈現。

干涉顯微鏡的分辨率通常可以達到納米級，能夠揭示細胞結構的細微變化，進一步提高了活細胞成像的精確性。這對于細胞生物學和醫學研究具有重要意義，尤其是在研究細胞疾病、細胞等領域時。

干涉顯微鏡的優勢與局限性

干涉顯微鏡在活細胞觀察中的一個主要優勢是其非侵入性。傳統的顯微鏡通常需要對細胞進行染色處理，這可能會影響細胞的正常生理活動。而干涉顯微鏡通過不接觸樣品的方式，能夠實時觀察細胞內的變化而不會對細胞造成直接影響。因此，這項技術成為了觀察活細胞、追蹤細胞動態過程的理想工具。

干涉顯微鏡也存在一定的局限性。由于其依賴于光波干涉的原理，這就要求顯微鏡系統的精度非常高，尤其是對光源的控制要求十分苛刻。干涉顯微鏡更適用于透明或半透明的樣品，對于不透明或高度復雜的樣本，其成像效果可能受到一定限制。干涉顯微鏡的操作和數據分析相對復雜，要求研究者具有一定的技術背景和經驗。

干涉顯微鏡在生物學研究中的應用

干涉顯微鏡在生命科學中有著廣泛的應用。例如，在癌癥研究中，研究者利用干涉顯微鏡觀察癌細胞的動態變化，探索其與正常細胞的差異。在神經科學中，干涉顯微鏡能夠幫助科學家實時觀察神經元的活動和突觸的變化，為研究大腦功能和疾病提供重要線索。該技術還被廣泛用于藥物篩選、細胞藥理學研究和臨床醫學檢測等領域。

結論

干涉顯微鏡在觀察活細胞方面具備巨大的潛力和優勢。它不僅能提供高分辨率的細胞圖像，而且不會對細胞產生任何干擾或損傷。盡管在操作上有一定的技術難度和局限性，但隨著技術的不斷發展和改進，干涉顯微鏡無疑將成為生命科學領域研究的核心工具之一。因此，干涉顯微鏡在活細胞觀察中的應用前景廣闊，值得繼續深入探索與應用。

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