
- 2025-01-10 10:50:00酵母展示抗體篩選技術
- 酵母展示抗體篩選技術是一種基于酵母細胞的抗體篩選方法。該技術通過將抗體基因整合到酵母基因組中,使抗體片段在酵母細胞表面表達。通過特定的篩選手段,如抗原結合篩選,可以從大量候選抗體中快速篩選出具有高親和力和特異性的抗體。該方法具有高通量、操作簡便、成本低廉等優勢,廣泛應用于抗體藥物研發、生物醫學研究等領域。通過酵母展示技術,研究人員能夠高效地獲得針對特定靶標的抗體,加速新藥研發進程。
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- 本文將探討酵母表面展示技術的原理、酵母抗體庫構建和篩選技術的實際應用,并展望其未來的發展方向。
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酵母展示抗體篩選技術問答
- 2025-05-16 10:01:10皓天試驗設備CIBF2025現場次日戰況,技術展示區成全場焦點
- 2025年5月16日,深圳國際會展中心作為新能源領域年度盛會,CIBF2025開展次日熱度持續攀升。在8B029展位,皓天試驗設備以“高精度環境模擬測試技術”為核心主題,吸引了大量專業觀眾駐足。從動力電池制造商到儲能系統集成商,從科研機構到行業媒體,展臺人流如織,工程師團隊全天候提供技術答疑,設備動態演示區更是被圍得水泄不通,現場熱度可見一斑。技術展示區:沉浸式體驗引爆互動熱潮在展臺核心區域,皓天展示的 SME-80PF高低溫試驗箱 與 THC-225PF-D電池隔爆試驗箱 成為焦點。前者以 -70℃至+150℃寬溫域覆蓋 和 ±0.5℃控溫精度 吸引了眾多電池企業技術代表,后者則憑借 泄壓防爆鏈設計 和 UL 1642/IEC 62133國際標準認證 ,成為安全測試領域的熱議話題。現場工程師通過實機運行演示,還原了電池在 極寒(-70℃) 與 高溫(150℃) 環境下的性能測試全流程。一位來自某頭部動力電池企業的技術負責人表示:“設備在嚴苛溫變下的穩定性和數據采集效率遠超預期,尤其是云端監控平臺的實時報告生成功能,大幅簡化了我們的驗證流程。”智能化解決方案:匹配行業需求皓天此次推出的 三大場景化測試方案 引發深度討論:嚴苛環境模擬 :覆蓋新能源電池全生命周期測試,支持從電芯到整包的可靠性驗證;AI能效優化 :集成智能算法的溫控系統實現能耗降低20%,同時提升測試效率;數據驅動管理 :通過 7英寸觸控屏編程 與 云端數據追蹤 ,實現多工位同步測試與遠程協作。展會期間,皓天還公開 定制化服務案例 ,例如為某航天企業設計的 -85℃超低溫測試模塊 ,以及為儲能系統定制的 多軸高低溫轉臺 ,充分展現了設備的行業適配性。客戶互動:技術研討與采購咨詢雙線并行在商務洽談區,皓天技術團隊圍繞“測試標準化”與“降本增效”主題,與客戶展開多輪研討。一位海外儲能系統集成商透露:“我們正在評估高低溫循環測試設備的采購需求,皓天的 復疊式制冷技術 和 2年整機延保服務 競爭力。”此外,展會優惠政策(如 設備采購折扣 與 免費方案定制 )進一步推動合作意向達成。據現場統計,開展僅兩日,皓天已收到 30+份設備申請 及 15家企業的深度合作邀約 。
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- 2023-12-25 17:14:18重組抗體的類型有哪些?
- 重組抗體,也被稱為重組免疫球蛋白,是通過基因工程技術將抗體的基因在合適的宿主細胞中表達并生產出來的一類抗體。與傳統的多克隆抗體和單克隆抗體相比,重組抗體具有更高的特異性和親和力,并且可以針對特定的抗原表位進行設計和優化。重組抗體的類型包括嵌合抗體、雙特異性抗體、抗體片段和Fc融合蛋白等。下面一起來看一下他們各種的應用:https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/recombinant-antibody-overview①嵌合抗體1975年,雜交瘤技術的發現徹底改變了抗體研究和臨床開發。然而,鼠源性抗體的療-效受到人抗鼠抗體(HAMA)效應的限制,鼠源性單抗對人體具有異種蛋白的免疫原性 ,在人體內半衰期較短。1984年,研究人員通過基因工程構建了第一個嵌合抗體,也是公認的第一種重組抗體,以降低鼠源抗體在人體內的免疫原性。其中,約30%-35%的分子來源于小鼠的抗體序列,約65%-70%來源于人的抗體序列。所得嵌合抗體保留了親代小鼠抗體的抗原結合能力。抗體嵌合是開發治-療性人源化抗體的第一步。義翹神州采用CDR移植技術和計算機輔助分子建模,提供高質量的單克隆抗體人源化服務,成功率高,人源化程度>90%。②抗體片段每一個完整的免疫球蛋白(IgG)分子包含通過二硫鍵連接的兩條重鏈和兩條輕鏈。抗體片段(如Fab、scFv和VHH)體積小,比其全長抗體具有更好的組織或腫瘤穿透力。因此,它們在免疫治-療方面具有巨大的前景,尤其是在實體瘤方面。此外,它們的半衰期也較短,可用作放射性顯像劑。然而,由于缺乏Fc區,它們不能引起Fc介導的抗體效應功能,如抗體依賴性細胞毒性(ADCC)和補體依賴性細胞毒性(CDC)。起初采用酶解法對IgG抗體進行片段化。胃蛋白酶作用于鉸鏈區二硫鍵所連接的兩條重鏈的近C端,水解產生被稱為F(ab’)2的二價Fab片段。然后,通過木瓜蛋白酶將該片段裂解為兩個相同的Fab片段。然而,酶解法限制了可制備的抗體片段類型,而且不適合工業化大規模生產和純化。隨著抗體工程技術的進步,這些問題可以通過重組生產抗體片段來解決。抗體基因克隆測序成功后,可通過瞬時轉染在原核表達系統(如大腸桿菌)和哺乳動物系統(HEK293細胞)中表達抗體片段。憑借豐富的重組生產經驗,義翹神州建立了高通量VHH表達平臺,交付了多個VHH抗體生產項目,總體成功率超過90%。除了常見的VHH形式,我們還可以表達雙特異和多特異VHH。此外,義翹神州還可以表達其他各種高特異性和親和力的抗體片段,如scFv和Fab。③雙特異性抗體與常規單克隆抗體不同,雙特異性抗體(bsAb)具有兩個結合位點,可識別同一抗原上兩個不同抗原或表位。由于這一特性,雙特異性抗體備受研究者和制藥業的關注。截止目前,美國食品藥品監督管理局(FDA)已批準了4種雙抗藥物,而且160多種雙抗正在進行臨床試驗,用于治-療癌癥、糖尿病、阿爾茨海默病和其他疾病。起初,雙特異性抗體通過四源雜交瘤技術制備,但這對下游抗體生產和純化構成了巨大的挑戰。隨著過去20年重組DNA技術的發展,出現了幾種雙特異性抗體形式,以適應所需的靶標-產品特征。為了解決重鏈錯配問題,Genentech首先提出了“knob-into-hole”(KiH)技術,該技術通過對CH3結構域進行改造,在每條重鏈中創建一個“knob”或一個“hole”,以誘導異源二聚化。同樣地,研究人員也采用了common light chain 和CrossMab等其他技術來解決輕鏈錯配問題。表達雙特異性抗體主要在哺乳動物細胞中進行。由于單克隆抗體和雙特異性抗體之間的各種結構相似性,許多已建立的常規單抗純化工藝也可適用于雙特異性抗體。(參見另一篇文章:“雙特異性抗體:抗體治-療中的新星”)④Fc融合蛋白Fc融合蛋白(又稱Fc嵌合融合蛋白、Fc-Ig和Fc標簽蛋白)是一種同源二聚體,由免疫球蛋白的Fc段與具有生物學活性的蛋白分子組成。雖然單克隆抗體是治-療性生物制劑開發的重-點,但Fc融合蛋白也是一類成功的生物制藥產品,至少有13種藥物獲得了歐洲藥品管理局(EMA)和美國FDA的批準。除治-療應用外,Fc融合蛋白還是基礎研究中的檢測試劑,包括流式細胞術、免疫組織化學和蛋白結合試驗。事實上,與Fc區的連接可以提高一些結合蛋白的溶解度和穩定性。鑒于其大小和對糖基化的需求(大多數是糖蛋白),Fc融合蛋白主要在哺乳動物表達系統中產生。目前,抗體工程技術取得了一定的進步,這極大地促進了各種形式重組抗體的開發,用于疾病治-療。FDA已批準了100多種抗體藥物,目前有多種抗體處于臨床后期開發階段。此外,重組抗體還可用于許多研究應用:蛋白免疫印跡(WB)、免疫組織化學(IHC)、免疫熒光(IF)、流式細胞術(FC)和表面等離子體共振(SPR)。總之,重組抗體是基因工程技術的重要應用之一,其類型多樣,具有廣泛的應用前景。隨著基因工程技術的發展,重組抗體的生產成本和安全性問題也將得到進一步優化,為臨床治-療和科學研究提供更多有效的工具。同時,我們也應該認識到重組抗體的潛在風險和挑戰,加強對其安全性和有效性的評估和監管,以確保其能夠更好地服務于人類的健康事業。更多重組抗體詳情關注:https://cn.sinobiological.com/news/recombinant-antibodies-formats
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- 2024-01-16 16:35:20免疫組化抗體(IHC)的實踐應用與常見問題詳解
- 免疫組化法(IHC)是使用抗體檢測組織切片(例如肝臟、胰-腺或心臟)中細胞蛋白質(抗原)的過程。 當組織樣本被送到實驗室進行疾病檢查時,有幾個細節不易確定。幾種疾病或疾病亞型在顯微鏡下可能看起來相似或看起來具有相似大小的細胞,但具有不同的行為和必要的治-療,區分它們的最佳方法是檢測這些細胞上作為標記的特定分子。免疫組化法(IHC)是一種使用抗體(匹配分子)的技術,用于尋找、識別附著在細胞上的標記物。在顯微鏡下可以看到抗體本身,這有助于技術人員進行精確識別。 免疫組化法(IHC)已廣泛應用于醫學中,特別是癌癥診斷。淋巴瘤是依賴于IHC進行正確診斷和治-療決策的癌癥之一。 免疫組化常見問題:問題一:我應該使用PIER還是HIER進行抗原修復? 固定過程可能會掩蓋抗原,導致抗體結合無法進行。這種掩蓋可以通過一種稱為抗原修復/抗原去掩蔽的技術來逆轉,該技術可以通過加熱(HIER;熱誘導抗原修復)或蛋白酶(PIER;蛋白水解誘導抗原修復)介導。后者使用蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等酶。PIER方法通過降解掩蓋表位的肽而起作用。然而,PIER也可能導致樣品形態或抗原本身的改變。因此,PIER的使用頻率低于HIER,后者通過恢復表位的二級和三級結構而起作用。為了確定是否應該進行抗原修復以及采用哪種方法,應遵循以下指南:進行文獻檢索,以確定其他研究人員如何可視化您感興趣的抗原。檢查抗體供應商是否推薦了特定的抗原修復-方案。如果沒有特定的協議可用,我們建議使用HIER而不是PIER協議。對于HIER,總是使用中性抗原修復緩沖液,并與未進行抗原修復的樣品進行比較。如果中性染色溶液沒有產生良好的染色效果,則應測試堿性或酸性抗原修復緩沖液。除了pH值外,其他需要優化的參數是溫度和持續時間。理想情況下,嘗試各種pH值、溫度和時間組合。為了排除由HIER過程引起的偽影,始終包括一個控制樣品,該樣品在沒有HIER步驟的情況下進行染色。 問題二:如何選擇IHC實驗的抗體,單克隆抗體還是多克隆抗體? 單克隆抗體和多克隆抗體的抗體特性決定了其優缺點。單克隆抗體是針對單個表位的同種免疫球蛋白。抗體是由一個動物的單個B細胞克隆產生的,因此在免疫化學上相似。多克隆抗體是針對同一抗原的各種表位的異質抗體混合物。抗體是由動物的不同B細胞克隆產生的,因此在免疫化學上不同。多克隆混合物中的抗體可能具有略微不同的特異性和親和力。 如果蛋白質靶標具有相同的氨基酸序列,單克隆抗體更合適。一旦抗原因各種原因發生構象變化,如蛋白質相互作用、翻譯后修飾、溫度、pH值、固定、鹽濃度等,單克隆抗體和抗原的聯合作用將受到嚴重影響。由于多克隆抗體具有多個表位,不受蛋白質構象變化的影響,一般來說,在一定范圍內的pH和鹽濃度內,多克隆抗體之間的抗原結合比單克隆抗體更穩定。 問題三:一抗的孵育時間多久?一抗的孵育時間與溫度,抗體濃度有關。一般情況下,在37℃的條件下,孵育1-2小時左右。在室溫的條件下,孵育3小時左右。在4℃的條件下,孵育18-24小時左右。 義翹神州提供石蠟切片免疫組化(IHC)檢測服務,更多免疫組化的問題可以上義翹神州網咨詢!https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service
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- 2023-03-20 12:39:19厭氧菌、絲狀菌等的培養、篩選真的很難嗎?
- 新型益生菌高通量厭氧發酵技術及應用我們使用BioLector XT對益生菌兩岐雙岐桿菌進行厭氧分批培養和補料分批培養,展示其操作的簡單易用性和可行性。您在做絲狀真菌嗎? ——利用BioLector高通量培養絲狀真菌BioLector系統適用于絲狀真菌如里氏木霉的高通量發酵,可獲得與傳統搖瓶發酵基本相同的形態、纖維素酶產量和生長動力。并且利用BioLector的光學在線測量能力可應用于包括基于報告基因的纖維素酶誘導的估算以及生長速率的在線測量。微生物反應器可以進行細胞裂解、應激及毒性篩選的測定嗎?BioLector XT高通量微型生物反應器它可以同時進行48個樣品的平行培養,每個培養體積為微升級別,并可以在線檢測各種信號,實現靈活補料和PH調控,且整個過程無需人員值守。因此無需改變任何配置,就既可以滿足微生物的高通量培養,又可以進行細胞裂解、應激及毒性篩選的測定。
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