
- 2025-01-10 10:50:04快速蛋白純化液相色譜系統(tǒng)
- 快速蛋白純化液相色譜系統(tǒng)是一種高效的蛋白分離技術(shù),通過(guò)液相色譜原理實(shí)現(xiàn)蛋白的快速純化。該系統(tǒng)具備高分辨率、高靈敏度及高自動(dòng)化程度等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、生物技術(shù)、食品科學(xué)等領(lǐng)域。其獨(dú)特的層析柱設(shè)計(jì)和洗脫條件優(yōu)化,能夠高效分離純化目標(biāo)蛋白,提高蛋白純度和回收率,是科研和生產(chǎn)中不可或缺的蛋白純化工具。
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快速蛋白純化液相色譜系統(tǒng)問(wèn)答
- 2024-11-11 15:49:41快速蛋白質(zhì)液相色譜有哪些特點(diǎn)?方法是什么?
- 快速蛋白質(zhì)液相色譜(Fast Protein Liquid Chromatography,簡(jiǎn)稱FPLC)是一種常用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)研究的高效分離技術(shù)。與傳統(tǒng)的液相色譜相比,F(xiàn)PLC能夠在更短的時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效的蛋白質(zhì)分離,且具有較高的分辨率和重現(xiàn)性。本文將深入探討快速蛋白質(zhì)液相色譜的主要特點(diǎn)、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)以及發(fā)展前景。高效分離與快速分析FPLC技術(shù)顯著的特點(diǎn)之一是其的分離效率和分析速度。通過(guò)利用專門(mén)設(shè)計(jì)的高效柱子和優(yōu)化的流動(dòng)相,F(xiàn)PLC能夠快速完成蛋白質(zhì)的分離過(guò)程。與傳統(tǒng)液相色譜技術(shù)相比,F(xiàn)PLC的運(yùn)行時(shí)間顯著縮短,可以在幾分鐘內(nèi)完成蛋白質(zhì)的分離和純化。這使得FPLC在需要快速篩選或分析樣本的實(shí)驗(yàn)中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。高分辨率和靈敏度FPLC能夠提供高分辨率的分離效果,確保不同蛋白質(zhì)分子在復(fù)雜混合物中的精確分離。通過(guò)精確控制流速和流動(dòng)相成分,F(xiàn)PLC能夠區(qū)分蛋白質(zhì)分子之間的細(xì)微差異,從而實(shí)現(xiàn)高靈敏度的檢測(cè)。FPLC系統(tǒng)通常配備有在線檢測(cè)器,可以實(shí)時(shí)監(jiān)控分離過(guò)程,確保分離效果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。這對(duì)于蛋白質(zhì)組學(xué)分析、抗體純化以及生物制藥過(guò)程中蛋白質(zhì)的質(zhì)量控制尤為重要。自動(dòng)化與高通量現(xiàn)代FPLC系統(tǒng)的自動(dòng)化程度較高,許多系統(tǒng)配備了自動(dòng)樣品進(jìn)樣、程序化梯度洗脫和數(shù)據(jù)分析功能。用戶可以預(yù)設(shè)程序,系統(tǒng)則自動(dòng)完成分離、純化及分析任務(wù)。這種自動(dòng)化不僅提高了工作效率,還降低了人為操作失誤的可能性,適合大規(guī)模、高通量的蛋白質(zhì)分析與純化。可調(diào)節(jié)的分離條件FPLC系統(tǒng)具有較強(qiáng)的靈活性,可以根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求調(diào)節(jié)分離條件,包括流速、洗脫梯度和流動(dòng)相的組成。通過(guò)這種方式,研究人員可以針對(duì)不同蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)(如親水性、疏水性、電荷等)選擇適合的分離模式。低成本與高效性相較于其他高級(jí)分離技術(shù)(如凝膠電泳、離心等),F(xiàn)PLC在成本效益上具有一定的優(yōu)勢(shì)。盡管初期設(shè)備投入較高,但其高效的分離能力、較短的操作時(shí)間以及較低的試劑消耗,使得長(zhǎng)期使用下的成本得到控制。應(yīng)用領(lǐng)域廣泛FPLC技術(shù)在生物學(xué)和化學(xué)研究中的應(yīng)用非常廣泛。它不僅在基礎(chǔ)科學(xué)研究中用于蛋白質(zhì)純化、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解析、酶活性研究等方面發(fā)揮重要作用,還在制藥行業(yè)、食品行業(yè)以及環(huán)保領(lǐng)域等具有重要應(yīng)用。在生物制藥領(lǐng)域,F(xiàn)PLC用于大規(guī)模生產(chǎn)高純度的蛋白質(zhì)藥物,如單克隆抗體、重組蛋白等。
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- 2023-10-07 16:28:22溫度對(duì)液相色譜系統(tǒng)究竟有多少影響
- 液相色譜儀能進(jìn)行很多微量和復(fù)雜樣品分析,在分析界算是精密儀器。很多精密儀器都有一個(gè)共同點(diǎn),那就是工作時(shí)受溫度影響,液相色譜儀也不列外,一般儀器都受溫度影響較大,其中流動(dòng)相、色譜泵、色譜柱、檢測(cè)池、氘燈等受溫度影響較大。液相色譜工作溫度大多都是15℃-35℃,當(dāng)然每個(gè)廠家,每個(gè)型號(hào)的儀器也都不太一樣,20℃-30......
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- 2024-01-18 16:05:57蛋白純化中的DTT:作用與應(yīng)用
- 在生物科學(xué)領(lǐng)域,蛋白質(zhì)純化是一個(gè)至關(guān)重要的過(guò)程,它有助于獲取單一、高純度的蛋白質(zhì),以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析。在這個(gè)過(guò)程中,二硫蘇糖醇(DTT)作為一種常用的還原劑,扮演著不可或缺的角色。本文將詳細(xì)探討DTT在蛋白純化中的重要作用。 一、DTT的作用機(jī)制 DTT是一種小分子化合物,具有很強(qiáng)的還原能力。其主要作用是還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵。在蛋白質(zhì)中,二硫鍵的形成對(duì)于維持蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)和功能至關(guān)重要。然而,在進(jìn)行蛋白質(zhì)純化時(shí),這些二硫鍵有時(shí)會(huì)成為障礙,影響蛋白質(zhì)的分離和純化。此時(shí),DTT就派上了用場(chǎng)。通過(guò)與二硫鍵反應(yīng),DTT能夠?qū)⑵溥€原為巰基,從而打破原有的二硫鍵,降低蛋白質(zhì)的聚合傾向,使其更容易進(jìn)行后續(xù)的純化步驟。 二、DTT在蛋白純化中的應(yīng)用 打破二硫鍵:在許多蛋白質(zhì)中,二硫鍵的形成維持了蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。在純化過(guò)程中,為了更好地分離和純化蛋白質(zhì),需要打破這些二硫鍵。DTT的引入可以有效地實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。防止蛋白質(zhì)聚合:某些條件下,蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生聚合,這會(huì)影響純化的效果。DTT可以通過(guò)還原二硫鍵,降低蛋白質(zhì)的聚合傾向,從而提高純化的效率和效果。輔助蛋白質(zhì)的分離和純化:在某些情況下,蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì)會(huì)因?yàn)槎蜴I的存在而受到影響,這會(huì)影響到蛋白質(zhì)在電泳或離子交換等分離技術(shù)中的行為。此時(shí),DTT可以改變蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì),使其更容易被分離和純化。 三、使用DTT時(shí)的注意事項(xiàng) 雖然DTT在蛋白純化中具有廣泛的應(yīng)用,但使用時(shí)仍需謹(jǐn)慎。首先,DTT具有一定的還原性,可能會(huì)影響某些實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性或?qū)е路翘禺愋苑磻?yīng)。因此,在使用DTT處理蛋白質(zhì)樣品時(shí),應(yīng)充分考慮其對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。其次,DTT的處理時(shí)間、濃度等條件需要進(jìn)行優(yōu)化,以避免對(duì)目標(biāo)蛋白造成不必要的修飾或破壞。最-后,處理過(guò)的蛋白質(zhì)樣品應(yīng)及時(shí)進(jìn)行下一步分析或保存,以避免重新形成二硫鍵或發(fā)生其他變化。 四、總結(jié) 總的來(lái)說(shuō),DTT在蛋白純化中起到了重要的作用,它能夠還原二硫鍵、打破蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)、降低蛋白質(zhì)的聚合傾向等。然而,使用DTT時(shí)也需要注意其對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響和可能帶來(lái)的問(wèn)題。未來(lái)隨著研究的深入和技術(shù)的發(fā)展,我們期待更加高效、準(zhǔn)確的蛋白純化方法出現(xiàn),為生物科學(xué)領(lǐng)域的研究提供更多可能性。 蛋白純化詳情可以關(guān)注義翹神州!https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification 義翹神州:蛋白與抗體的專業(yè)引領(lǐng)者,歡迎通過(guò)百度搜索“義翹神州”與我們?nèi)〉寐?lián)系。
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- 2023-06-30 10:24:49FireFly LIBS元素分布成像快速測(cè)量系統(tǒng)在醫(yī)學(xué)和動(dòng)物
- FireFly LIBS快速元素分布成像快速測(cè)量系統(tǒng),單次測(cè)量即可檢測(cè)元素周期表中幾乎所有元素、能夠進(jìn)行元素分布成像快速測(cè)量、對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷無(wú)消耗、無(wú)須樣品預(yù)處理、實(shí)驗(yàn)近乎零成本、 1秒鐘可測(cè)量多達(dá)100次,因此在動(dòng)物和人體的軟、 硬組織元素分析領(lǐng)域,F(xiàn)ireFly技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展迅速, 并廣泛應(yīng)用于病理、毒理、臨床診斷、藥理、營(yíng)養(yǎng)、古生物和古環(huán)境研究。案例一:FireFly LIBS技術(shù)和LA-ICP-MS技術(shù)應(yīng)用于腫瘤性質(zhì)分析對(duì)比左一、二、三圖:鱗狀細(xì)胞癌的LA-ICP-MS元素分布分析、病理切片圖、FireFly LIBS 30μm分辨率元素分布分析。右圖:LA-ICP-MS和LIBS技術(shù)在靈敏度、掃描空間分辨率、掃描速度上的比較 生物組織的生理和病理改變會(huì)影響其化學(xué)成分分布,LIBS技術(shù)能夠測(cè)量相應(yīng)的宏量及微量生物元素的濃度分布,進(jìn)而從化學(xué)的角度進(jìn)行癌癥早期篩查或者作為輔助癌癥診斷技術(shù)。本研究結(jié)果表明,癌變組織中Mg元素和Ca元素異常增 高。組織不同位置的LIBS元素譜線:病變的組織Mg、Ca元素特征峰異常增 高惡性黑色素瘤的FireFly LIBS元素分布成像表明Ca、Mg元素在病變位置含量異常增 高案例二:FireFly LIBS信號(hào)讀取方式應(yīng)用于免疫化學(xué)檢測(cè) 當(dāng)前癌細(xì)胞檢測(cè)通常應(yīng)用免疫組織化學(xué)(IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)方法,需要使用納米粒子標(biāo)記之后在光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)。但是可用的標(biāo)記種類少、多路復(fù)用能力差限制了該檢測(cè)方法的效果。Tag-LIBS技術(shù)使用上轉(zhuǎn)換納米顆粒(UCNPs)進(jìn)行標(biāo)記,信號(hào)強(qiáng)度高、可多元素同時(shí)檢測(cè)因而多路復(fù)用能力強(qiáng),因此可代替IHC和ICC方法。(A)免疫細(xì)胞化學(xué)方法;(B) Tag-LIBS方法:檢測(cè)Y II 437.49 nm 譜線具備HER2受體(BT-474)和不具備HER2受體(上);(MDA-MB-231) 的UCNP-SA標(biāo)記的細(xì)胞板的FireFly LIBS成像結(jié)果(下)。標(biāo)記濃度為7-700 μg/ml案例三:FireFly LIBS技術(shù)應(yīng)用于硬組織分析 分析牙齒、骨骼等硬組織的元素信息,能夠得到生物體的性別、健康、飲食、原籍和遷移等信息,在考古、人類學(xué)、法醫(yī)、醫(yī)療等研究中必不可少。本研究應(yīng)用FireFly LIBS技術(shù)對(duì)鉛暴露不同時(shí)間的小鼠的頜骨和股骨進(jìn)行快速元素分布成像分析,得到不同元素的平面微分辨率分布圖像。 FireFly同時(shí)具備標(biāo)準(zhǔn)分辨率和微區(qū)分辨率,二者之間可自動(dòng)切換,無(wú)須手動(dòng)調(diào)試光路。Ca和Mg分布成像測(cè)量使用FireFly 100μm完成,Pb、Sr分布成像測(cè)量使用FireFly 30μm分辨率完成。左圖為小鼠頜骨,右圖為小鼠股骨。參考文獻(xiàn):1. KONE?Ná, A.; PO?íZKA, P.; MODLITBOVá, P.; PROCHAZKA, D.; VRLíKOVá, L.; BUCHTOVá, M.;KAISER, J. Multi-elemental spatially resolved analysis of hard tissues by Laser-Induced BreakdownSpectroscopy. 2022.2. VYTISKOVá, K.; OBO?ILOVá, R.; NOVOTNY, K.; FARKA, Z.; SKLáDAL, P.; KAISER, J.; PO?íZKA, P.Detection of biomolecules labeled with photon-upconversion nanoparticles by laser-induced breakdownspectroscopy. ESAS-CSSC 2022 BOOK OF ABSTRACTS. Brno: Spektroskopická spole?nost Jana MarkaMarci, 2022. p. 154-154. ISBN: 978-80-88195-41-2.3. Kate?ina Kiss, Anna ?indelá?ová, Luká? Krbal, Václav Stejskal, Kristyna Mrázová, Jakub Vrábel, Milan Ka?ka, Pavlína Modlitbová, Pavel Po?ízka, Jozef Kaiserd, J. Anal. At. Spectrom., 2021,36, 909-916
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- 2024-11-22 16:46:49同步熱分析儀怎么快速降溫
- 同步熱分析儀是一種廣泛應(yīng)用于材料研究與開(kāi)發(fā)、質(zhì)量控制等領(lǐng)域的高端分析儀器,通過(guò)同時(shí)測(cè)量樣品的熱重變化和差示掃描量熱(DSC)信號(hào),幫助研究人員全面了解材料在熱過(guò)程中的性能。在實(shí)際操作中,快速降溫是一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié),尤其是在需要進(jìn)行多次測(cè)試或嚴(yán)格溫控的情況下。本文將圍繞同步熱分析儀的快速降溫方法展開(kāi),幫助用戶掌握高效、安全的操作技巧。為什么同步熱分析儀需要快速降溫?在熱分析過(guò)程中,不同材料的研究需要特定的溫度區(qū)間,而溫度恢復(fù)的效率直接影響實(shí)驗(yàn)周期與結(jié)果的精確性。例如,在測(cè)試完成后,快速降溫可以縮短實(shí)驗(yàn)等待時(shí)間,從而提升工作效率。對(duì)于一些溫敏性材料,降溫速度的控制直接決定其性能的再現(xiàn)性。因此,掌握快速降溫的技術(shù),對(duì)于提升實(shí)驗(yàn)效率和數(shù)據(jù)質(zhì)量具有重要意義。同步熱分析儀快速降溫的常用方法自然冷卻 自然冷卻是基礎(chǔ)的降溫方式,依賴環(huán)境溫度與儀器本身的導(dǎo)熱性能,將熱量緩慢散失。雖然這一方法對(duì)設(shè)備的影響較小,但冷卻時(shí)間較長(zhǎng),適合不緊急的實(shí)驗(yàn)條件。外接制冷系統(tǒng)使用液氮或外置冷卻設(shè)備可以顯著提高降溫效率。這些系統(tǒng)通過(guò)強(qiáng)制性制冷手段將爐體溫度快速降低,但需要注意液氮供給的穩(wěn)定性以及與儀器的兼容性。風(fēng)冷輔助風(fēng)冷系統(tǒng)利用高效風(fēng)扇加速空氣流動(dòng),帶走爐體表面的熱量。這種方法操作簡(jiǎn)單,成本較低,適合中低溫范圍的快速冷卻。程序降溫控制許多現(xiàn)代同步熱分析儀配備智能程序降溫功能,通過(guò)設(shè)置降溫曲線,在保證降溫速率的同時(shí)避免因驟冷對(duì)儀器或樣品造成損害。這種方法結(jié)合了效率和安全性,適合大多數(shù)實(shí)驗(yàn)需求。快速降溫需注意的事項(xiàng)在追求快速降溫的用戶應(yīng)關(guān)注以下幾點(diǎn):避免熱應(yīng)力:儀器材料和樣品在快速降溫過(guò)程中可能因熱應(yīng)力導(dǎo)致?lián)p傷,建議按照儀器操作手冊(cè)的規(guī)定設(shè)置降溫速率。維護(hù)與清潔:定期清理冷卻裝置,確保冷卻路徑暢通無(wú)阻。冷卻介質(zhì)的選擇:如使用液氮或其他制冷劑,應(yīng)確保使用高純度產(chǎn)品,避免因雜質(zhì)堵塞或腐蝕設(shè)備。結(jié)語(yǔ)掌握同步熱分析儀快速降溫的技巧不僅能提升實(shí)驗(yàn)效率,還能延長(zhǎng)儀器的使用壽命。在操作過(guò)程中,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的方法,并關(guān)注相關(guān)的注意事項(xiàng),才能實(shí)現(xiàn)高效、安全的操作。通過(guò)合理的降溫技術(shù)運(yùn)用,科研工作者可以更加高效地挖掘材料的熱性能潛力,為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性提供保障。
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