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2025-01-10 10:50:30適配體文庫篩選: 適配體文庫篩選是一種基于SELEX（Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment）技術(shù)的篩選方法，用于從大量隨機(jī)序列的DNA或RNA文庫中，識(shí)別并篩選出能與特定靶標(biāo)（如蛋白質(zhì)、細(xì)胞、小分子等）高親和力結(jié)合的適配體。該過程包括文庫構(gòu)建、靶標(biāo)孵育、分離結(jié)合序列、擴(kuò)增及多輪迭代篩選，直至獲得特異性好、親和力強(qiáng)的適配體。這些適配體在疾病診斷、靶向治療、藥物開發(fā)等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用潛力。

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【卡梅德生物】SELEX技術(shù)|核酸適配體文庫篩選服務(wù)

卡梅德生物科技（天津）有限公司 64
2024-01-26
SELEX 核酸適配體核酸

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適配體文庫篩選問答

2022-08-09 11:23:27可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒說明書: 關(guān)鍵詞：可溶性腫瘤壞死因子 BUNSEN本生酶聯(lián)免疫試劑盒　　可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒說明書　　實(shí)驗(yàn)原理:　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中血清素/血清胺(ST)水平。用純化的血清素/血清胺(ST)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血清素/血清胺(ST)，再與HRP標(biāo)記的血清素/血清胺(ST)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血清素/血清胺(ST)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中血清素/血清胺(ST)濃度。　　標(biāo)本要求:　　1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融　　2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。　　樣本處理及要求：　　1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果)，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。　　4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　試劑盒性能：　　1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。　　2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。　　3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。　　操作步驟：　　1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。　　80pg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液　　40pg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液　　20pg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液　　10pg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液　　5pg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液　　2.加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。　　3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。　　4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。　　6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。　　7.溫育：操作同3。　　8.洗滌：操作同5。　　9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.　　10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。　　11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。　　操作程序總結(jié):　　計(jì)算：　　以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。　　注意事項(xiàng)：　　1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。　　2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。　　3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。　　4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。　　6.底物請(qǐng)避光保存。　　7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).　　8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。　　9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

2023-01-10 12:42:52貝克曼庫爾特Biomek NGeniuS與IDT文庫制備自動(dòng)化解決方案: 隨著基因組測(cè)序和數(shù)據(jù)分析方法的廣泛普及，越來越多的實(shí)驗(yàn)室正在探索下一代測(cè)序（Next-Generation Sequencing，NGS）作為研究工具的可行性。然而，NGS文庫的手動(dòng)制備過程單調(diào)乏味，根據(jù)所構(gòu)建文庫的類型而異，耗時(shí)從數(shù)小時(shí)到數(shù)天時(shí)間不等，并且操作過程中必須小心謹(jǐn)慎，以避免人工出錯(cuò)導(dǎo)致的制備失敗，浪費(fèi)寶貴樣本。Biomek NGeniuS系統(tǒng)是一款全自動(dòng)文庫制備系統(tǒng)，幫助我們從第一步即確保正確無誤。DNA樣品上機(jī)，撥動(dòng)轉(zhuǎn)盤，按下按鈕，運(yùn)行過程無需值守，每批次可支持運(yùn)行4-24任意數(shù)量的樣品，是實(shí)驗(yàn)室追求靈活性和自動(dòng)化的理想之選。圖1 Biomek NGeniuS全自動(dòng)文庫制備系統(tǒng)IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit 便是一款支持自動(dòng)化的試劑盒。該試劑盒提供高一致性的文庫制備方法，獨(dú)特的兩步連接法能夠有效抑制接頭二聚體和模板DNA自連，因而可有效提高文庫轉(zhuǎn)換率，尤其適用于cfDNA和FFPE等低質(zhì)量樣品，有助于研究人員發(fā)現(xiàn)和表征腫瘤樣品中出現(xiàn)的低頻變異位點(diǎn)。圖2 IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit工作流程我們使用Biomek NGeniuS系統(tǒng)對(duì)三種不同類型的樣品，cfDNA、FFPE和gDNA，分別構(gòu)建24個(gè)、10個(gè)和4個(gè)文庫。cfDNA 樣品所得文庫平均濃度為16.67ng/μL。cfDNA樣品連接后擴(kuò)增片段平均長(zhǎng)度為362bp，長(zhǎng)度分布一致且呈正態(tài)。與參考基因組相比，該樣品組從NGeniuS實(shí)驗(yàn)中獲得的所有文庫比對(duì)率為99.49%，配對(duì)的reads比對(duì)到參考基因組的比對(duì)率為99.84%。23份樣品中reads平均重復(fù)率為0.46%。圖3 以cfDNA為起始樣品，在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。FFPE樣品構(gòu)建的文庫平均片段長(zhǎng)度為378 bp，長(zhǎng)度呈正態(tài)分布。與參考基因組相比，該樣品組從NGeniuS實(shí)驗(yàn)中獲得的所有文庫比對(duì)率為99.8%，配對(duì)的reads比對(duì)到參考基因組的比對(duì)率為99.84%。10份樣品中reads平均重復(fù)率為0.37%。圖4 以FFPE DNA為起始樣品，在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。gDNA樣品制備的文庫平均片段長(zhǎng)度為391bp，長(zhǎng)度分布與 IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit 的預(yù)期一致。與參考基因組相比，該樣品組從 NGeniuS實(shí)驗(yàn)中獲得的所有文庫的比對(duì)率為99.2%，配對(duì)的reads比對(duì)到參考基因組的比對(duì)率為99.3%。3份樣品中reads平均重復(fù)率為0.56%。圖5 以gDNA為起始樣品，在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。在Biomek NGeniuS全自動(dòng)文庫制備系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep kit構(gòu)建文庫，所得文庫片段大小分布一致，并符合IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit說明書建議的文庫大小范圍。對(duì)三種不同濃度的樣品重復(fù)進(jìn)行測(cè)序，結(jié)果表明，平均文庫大小為362~391bp。所獲文庫比對(duì)率>99.2%，配對(duì)的reads比對(duì)到參考基因組的比對(duì)率>99.3%，重復(fù)率

2023-03-20 12:39:19厭氧菌、絲狀菌等的培養(yǎng)、篩選真的很難嗎？: 新型益生菌高通量厭氧發(fā)酵技術(shù)及應(yīng)用我們使用BioLector XT對(duì)益生菌兩岐雙岐桿菌進(jìn)行厭氧分批培養(yǎng)和補(bǔ)料分批培養(yǎng)，展示其操作的簡(jiǎn)單易用性和可行性。您在做絲狀真菌嗎？ ——利用BioLector高通量培養(yǎng)絲狀真菌BioLector系統(tǒng)適用于絲狀真菌如里氏木霉的高通量發(fā)酵，可獲得與傳統(tǒng)搖瓶發(fā)酵基本相同的形態(tài)、纖維素酶產(chǎn)量和生長(zhǎng)動(dòng)力。并且利用BioLector的光學(xué)在線測(cè)量能力可應(yīng)用于包括基于報(bào)告基因的纖維素酶誘導(dǎo)的估算以及生長(zhǎng)速率的在線測(cè)量。微生物反應(yīng)器可以進(jìn)行細(xì)胞裂解、應(yīng)激及毒性篩選的測(cè)定嗎？BioLector XT高通量微型生物反應(yīng)器它可以同時(shí)進(jìn)行48個(gè)樣品的平行培養(yǎng)，每個(gè)培養(yǎng)體積為微升級(jí)別，并可以在線檢測(cè)各種信號(hào)，實(shí)現(xiàn)靈活補(bǔ)料和PH調(diào)控，且整個(gè)過程無需人員值守。因此無需改變?nèi)魏闻渲茫图瓤梢詽M足微生物的高通量培養(yǎng)，又可以進(jìn)行細(xì)胞裂解、應(yīng)激及毒性篩選的測(cè)定。

2022-09-19 15:43:03聚合物材料適合用什么顯微鏡相機(jī)？: 聚合物材料又稱加聚物，是由長(zhǎng)的、重復(fù)的分子鏈制成的材料。這些材料具有獨(dú)特的性質(zhì)，具體取決于被結(jié)合的分子的類型以及它們?nèi)绾谓Y(jié)合。一些聚合物可以彎曲和拉伸，如橡膠和聚酯；其他的則堅(jiān)硬而堅(jiān)韌，例如環(huán)氧樹脂和玻璃。聚合物幾乎觸及現(xiàn)代生活的方方面面。大多數(shù)人可能在過去五分鐘內(nèi)至少接觸過一種含聚合物的產(chǎn)品——從水瓶到小工具再到輪胎。如果我們觀察拍攝聚合物，一般采用什么顯微鏡相機(jī)？客戶有臺(tái)奧林巴斯顯微鏡BX51需要一款顯微鏡相機(jī)和光源用于觀察聚合物材料，明美銷售經(jīng)理推薦顯微鏡相機(jī)MSX2和顯微鏡光源MG-100，像素高達(dá)千萬水平，并且具備充足的靈敏度，滿足明場(chǎng)和熒光觀察需要。BX51搭配顯微鏡相機(jī)MSX2觀察聚合物材料BX51搭配顯微鏡相機(jī)MSX2和MG-100觀察聚合物材料MSX2是我司研發(fā)的科研級(jí)數(shù)字相機(jī)，采用大靶面高性能的成像芯片，像素高達(dá)1250萬，設(shè)計(jì)USB3.0數(shù)據(jù)傳輸接口，具有高分辨率、顏色還原準(zhǔn)確和高靈敏度的特點(diǎn)，其色彩表現(xiàn)，是液基細(xì)胞分析、免疫組化、細(xì)胞分析等對(duì)顏色要求高的病理診斷的理想工具。此外在明暗場(chǎng)、相襯、偏光、DIC、熒光成像等領(lǐng)域同樣表現(xiàn)。科研級(jí)數(shù)字相機(jī)MSX2寬光譜大功率LED光源MG-100,覆蓋UV和可見光光譜；壽命長(zhǎng)，可達(dá)傳統(tǒng)汞燈50倍；響應(yīng)快發(fā)熱低，可即開即用；更安全，紫外波段可單獨(dú)開關(guān)；亮度穩(wěn)定，各波段亮度自由調(diào)節(jié)。寬光譜大功率LED光源MG-100如果您對(duì)顯微鏡相機(jī)和顯微鏡光源感興趣或有疑問，歡迎與我們聯(lián)系，期待與您相約！本文網(wǎng)址：http://www.mshot.com.cn/kehuanli/20220826.html，轉(zhuǎn)載請(qǐng)保留出處，謝謝！

2022-09-02 14:06:42溶解氧快速檢測(cè)儀適應(yīng)于哪些行業(yè)？: 根據(jù)實(shí)際的操作體驗(yàn)我們覺得在實(shí)際的使用過程當(dāng)中需要結(jié)合自身的實(shí)際情況來做出相關(guān)的判斷和選擇，因?yàn)樵谑褂萌芙庋蹩焖贆z測(cè)儀的過程當(dāng)中可能會(huì)根據(jù)我們使用方式的不同，導(dǎo)致使用溶解氧快速檢測(cè)儀效果的不同。所以我們需要結(jié)合自身的實(shí)際情況來進(jìn)行相關(guān)的操作。只有這樣，才能夠保證在實(shí)際的使用過程當(dāng)中，盡可能的達(dá)到我們想要達(dá)到的相關(guān)效果。所以說，選擇一款好的溶解氧測(cè)定儀十分的重要。那么如何選擇一個(gè)好的溶解氧快速檢測(cè)儀呢，其實(shí)并不困難，我們?cè)谶x擇溶解氧快速檢測(cè)儀的過程當(dāng)中，不僅僅需要關(guān)注溶解氧測(cè)定儀的品質(zhì)，還需要關(guān)注售后服務(wù)，只有售后服務(wù)好的產(chǎn)品才可以在的實(shí)際使用過程當(dāng)中，為使用者帶來便利，盡可能的解決相關(guān)的問題。溶解氧快速檢測(cè)儀基于物理學(xué)中特定物質(zhì)對(duì)活性熒光的猝熄原理，廣泛的應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖等行業(yè)的水質(zhì)溶解氧檢測(cè)。