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2025-07-29 16:46:33單克隆篩選
單克隆篩選是一種生物學技術,旨在從混合細胞群體中分離出單一細胞來源的克隆。該技術通過培養細胞,并利用細胞間的生長差異,挑選出單獨生長的細胞集落,每個集落均源自一個祖先細胞。這種方法常用于雜交瘤細胞篩選,以生產單克隆抗體,也應用于其他需要高純度、均一性細胞系的場合。通過單克隆篩選,可以獲得遺傳性狀一致的細胞群,為后續的實驗或治療提供可靠的材料。

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2023-05-20 12:59:12測定單克隆細菌群體中單細胞對抗生素的敏感性
鑒于抗菌素耐藥性的出現,了解細胞群體對抗生素反應的異質性至關重要。因為藥物可以施加選擇壓力,導致抗性表型的出現。迄今為止,無論是整體方法還是單細胞方法都無法將單細胞易感性的異質性與人群對抗生素的反應聯系起來。在這里,我們提出了一個平臺,通過使用錨定微流體滴和圖像和數據分析管道,測量單個大腸桿菌細胞在不同環丙沙星濃度下形成小菌落的能力。微流控結果與抗生素敏感性的經典微生物學測量結果進行了基準測試,顯示池微流控芯片與重復的批量測量結果之間的一致性。此外,單細胞形成菌落的實驗可能性用于提供概率抗生素敏感性曲線。除了概率觀點外,微流控格式還可以隨著時間的推移對大量單個細胞的形態特征進行表征。該管道可用于比較不同菌株對具有不同作用機制的抗生素的反應。
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2023-03-20 12:39:19厭氧菌、絲狀菌等的培養、篩選真的很難嗎?
新型益生菌高通量厭氧發酵技術及應用我們使用BioLector XT對益生菌兩岐雙岐桿菌進行厭氧分批培養和補料分批培養,展示其操作的簡單易用性和可行性。您在做絲狀真菌嗎? ——利用BioLector高通量培養絲狀真菌BioLector系統適用于絲狀真菌如里氏木霉的高通量發酵,可獲得與傳統搖瓶發酵基本相同的形態、纖維素酶產量和生長動力。并且利用BioLector的光學在線測量能力可應用于包括基于報告基因的纖維素酶誘導的估算以及生長速率的在線測量。微生物反應器可以進行細胞裂解、應激及毒性篩選的測定嗎?BioLector XT高通量微型生物反應器它可以同時進行48個樣品的平行培養,每個培養體積為微升級別,并可以在線檢測各種信號,實現靈活補料和PH調控,且整個過程無需人員值守。因此無需改變任何配置,就既可以滿足微生物的高通量培養,又可以進行細胞裂解、應激及毒性篩選的測定。
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2023-05-17 13:40:03AccuSizer 顆粒計數器用于蛋白質配方篩選和 USP <787> 測試
全文共 1386 字,閱讀大約需要 5 分鐘AccuSizer? 自動顆粒計數分析儀可用于蛋白質配方優化,最 大程度地減少蛋白質聚集并執行 USP 亞可見顆粒物質測試。簡介動態光散射 (DLS) 是檢測蛋白質粒徑的標準工具,但該方法不提供濃度信息。AccuSizer? 單粒子光學傳感技術 (SPOS) 系統可用于檢測聚集蛋白粒徑和濃度,可測量150nm以上的聚集蛋白濃度。圖 1 顯示了單抗產品熱應激前后的 Nicomp? DLS 結果。加熱后的結果(藍色)顯示了高分辨率的多峰結果,包括從~150 nm開始的較大的聚集峰。AccuSizer 無法檢測到 10 nm 的顆粒,但可以提供 >150 nm聚集蛋白的定量數據。在這項研究中,AccuSizer FX Nano 用于研究各種配方穩定化學物質如何影響NIST標準蛋白質的最 終聚集狀態。AccuSizer FX Nano也可用于 USP 亞可見顆粒物測試1。材料使用的蛋白質是 NIST 標準物質 8671,批號 14HB-D002,NIST mAb,人源 IgG1k 單抗2。在Nicomp動態光散射(DLS)系統上,使用35mw激光二極管源,APD檢測器測量蛋白質的初次粒徑。在配備兩個傳感器的AccuSizer FX Nano SIS系統上測量蛋白質聚集體:LE-400; 0.5 – 400 μm 和 FX Nano; 0.15 – 10 μm.SIS進樣器提供精確的樣品體積,最 小進樣量低至100 μL且可回收。iFormulate3(圖 2)板預裝了配方,由 DoE 設計用于合理的配方開發,用于測試配方的聚集水平。評估了蛋白配方的四個主要影響因素;pH、離子強度、緩沖液和穩定劑濃度。使用的 iFormulate 板測試了以下影響因素:? pH:5 – 7.6? 離子強度:0 – 200 mM NaCl? 海藻糖穩定劑:0 – 10 %? 緩沖液濃度:10 – 50 mM方法將 NIST mAb 解凍并稀釋至 1 mg/mL,將 160 μL 過濾的去離子水添加到 iFormulate 板的每個孔中。每孔加入40 μL NIST mAb。將培養皿置于60°C(剛好低于蛋白質熔點)的烤箱中24小時。使用 AccuSizer 顆粒計數器分析每個孔。將>0.15 μm(總)和>0.53 μm的顆粒計數數據提交給iformula,由iformula進行數據分析和穩定性建模。結果數據使用帕累托分析方法處理,帕累托分析方法在多影響因素下十分有效。帕累托分析給出了影響因素排名和影響因素之間的相互作用。圖 3 和圖 4 分別顯示了 >0.15 μm 和 >0.53 μm 的帕累托分析。顏色表示配方變量對增加的顆粒計數的相對重要性,藍色 = 重要,灰色 = 臨界,紅色 = 不太重要。下面的結果顯示了不同條件下聚集效應的 3D 響應曲面圖。這種設計空間提供了通過檢測在兩個粒徑范圍內顆粒濃度的方法,以此來確定可最 大限度減少聚集配方。圖 5 和圖 6 顯示了在保持緩沖液和 NaCl 濃度不變的情況下,改變 pH 值和穩定劑(海藻糖)的結果。圖5 pH值和穩定劑的影響>0.15μm圖6 pH值和穩定劑的影響>0.53μm圖 7 和圖 8 顯示了不同 NaCl 和穩定劑(海藻糖)濃度的結果,同時保持緩沖液濃度穩定且 pH 值從 5.91 略微變化到 6.3。圖7 NaCl和穩定劑的作用>0.15μm圖8 NaCl和穩定劑的作用>0.53μm然后對這些結果以及此處未顯示的其他結果進行整理,圖9和圖10顯示了最 小粒子數優化圖。圖9 顆粒最 小化圖>0.15μm圖10 顆粒最 小化圖>0.53μm結論此處顯示的結果表明,可最 大程度減少顆粒計數并因此減少蛋白質聚集的最 佳化學制劑為:pH = 6.1 – 6.3NaCl = 40 – 70 mM海藻糖 = 7 – 8%緩沖液 = 50 mMAccuSizer也可用于在≥10和25μm的條件下進行USP<787>測試,并可使用A2000 USP微孔板分析儀實現自動化。
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2023-08-09 13:42:02低至3折 | Clean NGS高通量測序產物純化及片段篩選磁珠限時促銷
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