- 2025-01-21 09:31:20磷酸鹽校正曲線
- 磷酸鹽校正曲線是用于校準或驗證磷酸鹽濃度測量結果的圖形表示。通過一系列已知磷酸鹽濃度的標準溶液測量，繪制出吸光度或熒光強度與磷酸鹽濃度之間的關系曲線。此曲線有助于校正儀器誤差，提高測量準確性。在環境監測、水質分析、生物學實驗等領域，磷酸鹽校正曲線是確保數據可靠性的重要工具。
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磷酸鹽校正曲線問答
- 2021-09-26 10:55:38Tris（77-86-1）與磷酸鹽緩沖液的選擇
- Tris和磷酸鹽都是很常用的緩沖液，它們有相同的地方也有很多不同的地方，如何能在使用時正確分辨和選擇，這也是難倒了一批人。我們今天就先從它們各自的應用及使用環境講起。讓你能很直觀的感受到它們的區別。Tris緩沖液在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系穩定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑；Tris緩沖液的低離子強度特點還可用于線蟲的中間纖維的形成；在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩定和存儲；將調節pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。磷酸鹽緩沖液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調整適宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用，會破壞生物蛋白的結構及生物特性；生理鹽水不具有調整pH的作用，對完整的、有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應，所以使用PBS是先選。當然，有的生物活性物質需要的條件比較高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持合適的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。因此PBS主要用于細胞實驗，其緩沖范圍最適宜在中性（7.0）。在生物化學實驗中要慎重地選擇緩沖溶液，不僅要考慮緩沖液的緩沖范圍，還要綜合考慮緩沖液的使用環境：1. 磷酸鹽緩沖溶液的緩沖范圍比較寬，但是它在pH7.5以上時緩沖能力很小；Tris本身呈堿性，可以只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液，方法也較為簡單，對于不同的實驗，Tris還可以與其他物質組成多種緩沖體系。2. 磷酸鹽緩沖溶液易與常見的Ca2+離子、Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀，同時會抑zhi某些生物化學過程以及多數酶的活性，包括激酶，磷酸化酶，脫氫酶等；相比之下Tris緩沖溶液對生物化學過程干擾很小，也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發生沉淀。若反應體系中存在金屬離子或者酶制劑，則以Tris緩沖溶液為較優選擇。3. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較磷酸鹽緩沖溶液大，同樣稀釋十倍，磷酸鹽緩沖溶液的pH值變化小于0.1，而Tris緩沖液的pH值變化則大于0.1。因此對于體積變化較大的反應體系，則應慎重使用Tris 緩沖液。4. 另外，Tris緩沖溶液受環境影響較大。一般來說，溫度每升高一度，pH值下降0.03； 同時其易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。
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- 2021-09-16 11:34:16磷酸鹽、TRIS、HEPES、PIPES緩沖劑的了解
- 如何選擇緩沖劑？選擇緩沖體系，其解離常數pKa值應該在設定的pH上下一個pH值單位內，因為緩沖液的pKa變化超過一個pH單位時，其緩沖能力就會明顯下降；緩沖體系不應影響蛋白質的活性或者DNA的穩定性，并避免其他離子的干擾；另外，還要考慮溫度的影響：溫度不僅對緩沖液有影響，對細胞也有影響，大多數動物細胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5，而在溫度下降到0℃時可達到8.0。一、磷酸鹽緩沖液的優缺點：是使用很廣泛的一種緩沖劑，由于它有二級解離，所以緩沖的pH值范圍很廣，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。優點：易配成各種濃度適用pH范圍寬pH受溫度影響小稀釋后pH變化小缺點：易與常見的鈣離子、鎂離子及重金屬離子締合成沉淀。二、Tris緩沖液的優缺點：Tris緩沖液是在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍。優點：堿性較強，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的但范圍pH緩沖液；對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發生沉淀；易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封；此緩沖液對某些pH電極發生一定干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。缺點：pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1溫度效應大，如4℃時pH=8.4，37℃時pH=7.4三、HEPES緩沖液的優缺點：HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。優點：在開放式培養或細胞觀察時能維持較恒定的pH值，并對細胞無毒性作用。缺點：在高濃度時對一些細胞可能有毒，與其他緩沖劑相比價格略貴。四、PIPES緩沖液的優缺點：PIPES是哌嗪緩沖液家族的一員，與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液，在6.1至7.5的pH范圍內有效。由于pH范圍與HEPES略有不同，PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。優點：該緩沖劑不會與金屬絡合，因此可用于含金屬離子的溶液；可以用于色譜分析，電子顯微鏡固定植物細胞，以及代替草甘膦緩沖液。缺點：當溶液的pH值升高到6.5以上時，PIPES的游離酸才容易溶解，但是PIPES的鈉鹽很容易溶解；如果使用的是游離酸形式的緩沖液，請使用氫氧化鈉將其轉化為鈉鹽，以提高在較低pH下的溶解度；像HEPES一樣，PIPES不適用于涉及氧化還原反應的實驗，因為它會導致自由基的形成。
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- 2020-04-02 10:58:50如何用校正曲線法對鋼鐵中含量低于1%的C元素進行定量分析？
- 【問題的提出】 一方面，由于碳污染無處不在、很難控制以及分光晶體本身是由含 C 元素的材質構成等原因，準確測量 C 是所有顯微分析中的一個難點，另一方面，鋼鐵和某些材料用戶，準確測量碳鋼中的碳濃度又是一件必須的事情，為此，電子探針分析中開發出了校正曲線法，實現碳鋼中的 C 含量準確定量分析。 該分析方法基于————鋼中 C 含量低于 1%時，C 的 X 射線強度和濃度滿足線性關系。 對于鋼中碳化物的 C 的定量分析仍需要 ZAF 分析方法來測量。【測量原理】低碳鋼中 C 含量的精確定量測定步驟 ? 選用 4 個（或 5 個）已經碳含量（C）的低碳鋼作為標準樣品 ? 選擇 LDE2 晶體或 LDE2H 晶體分別對上述標準樣品進行碳的 X 射線強度測量（I） ? 利用 JXA-8230 電子探針的 Calibration Curve Quantitative Method 標準軟件及上述測量數據，可以得到如下圖所示的 I—C 直線 ? 選擇上述 4 個標準樣品中的某一個樣品作為未知樣品，再次測量這個樣品的碳的 X射線強度 Ix，利用上述 I—C 曲線，就可以算出對應于 Ix 的 Cx ? Cx 和已知的該標準樣品的碳濃度 C 一致 下面操作步驟是山東大學材料學院劉樹帥老師整理的詳細步驟，供大家參考。在此，我們也對他的辛勤工作表示由衷的感謝！！！一、標樣庫的建立1、標樣的選擇： 需要具備含碳量低于 1%的五個鋼鐵樣品標樣；2、分光晶體的選擇： 利用 LDE2H 或 LDE6H 探測含量較低的 C 元素；3、建立標樣分析條件的設置： （1）建立 Fe-C 標樣的標樣庫（Std.Mng）； （2）建立標樣的峰位及強度信息(STD)： 首先，分析條件的選擇： #1：由于標樣中 C 含量較低，且 C 元素特征 X-ray 的波長較長，為了保證足夠的計數強度，加速電壓推薦設置為 15KV，束流 500nA； #2：電子束與樣品交互作用時，由與碳沉積等因素會對標樣中某一位置的含 C 量造成影響，因此，標樣的采集選擇同步控制法（即保持 PCD 的常開狀態），特別提醒：同步控制法中 PCD的常開狀態僅在 Accumulation 狀態下生效，定量分析時不會起作用。 同時，標樣的采集不再進行尋峰和扣背底，縮短電子束在標樣上的駐留時間； #3：標樣分析位置的采集以及束斑尺寸的選擇： 由于標樣中 C 元素的含量較低，可能存在碳含量分布不均的情況，因此，需要采用Accumulation 的方式錄入標樣位置信息（通常采用陣列的方法錄入，如選擇合適的陣列數，根據標樣選擇恰當的步長），利用光鏡逐一核對標樣位置；推薦束斑尺寸為 50μm； #4：譜儀和分光晶體的選擇，C 元素峰位的標記： 通常，根據機器配置，選擇 LDE2H 或 LDE6H 分光晶體，同時，在距離采集強度信息較遠的位置處尋峰；另外，為了盡可能的弱化碳沉積，將 Peak 采集時間由默認 10s 更改為 2s，Acquire 后獲得校正曲線； #5：打開校正曲線的窗口，點擊 confirm，對采集數據中偏離較大的數值進行合理的刪減， 然后重新計算平均強度（挑肥揀瘦）； 通過以上系列操作，建立起校正曲線的標樣信息。二、未知樣品的定量分析： #1：加速電壓 15KV，束流 500nA； #2：修正方法：選擇 Calibration Curve 法，并設置尋峰和背底均為 none； #3：束斑尺寸：50μm，分析位置可根據需求進行設置； #4：分光晶體選擇 LDE2H 或 LDE6H，peak 駐留時間 2s，選擇建立的校準曲線標樣信息； #5：獲得微量 C 元素定量分析的結果；Intensity & Wt. % Group : Fe-C-STD-2 Sample : Fe-C-STD-2_0002_QNT Page 1 Unknown Specimen No. 1 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 1 Comment :Stage : X= -28.5292 Y= -1.3514 Z= 10.7345 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:42:49 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.999E-007 23219.8 2.0 152.3Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.6921 100.0000 23224.4 0.0045 ---------------------------------------------------------------------------------------Total 0.6921 100.0000 23224.4Unknown Specimen No. 2 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 2 Comment : Stage : X= -28.4311 Y= -1.7044 Z= 10.7450 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:01 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.996E-007 22449.8 2.0 149.83Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.6332 100.0000 22467.8 0.0042 ---------------------------------------------------------------------------------------------Total 0.6332 100.0000 22467.8Unknown Specimen No. 3 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 3 Comment : Stage : X= -28.7638 Y= -1.7638 Z= 10.7525 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:13 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.997E-007 21204.4 2.0 145.62Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.5358 100.0000 21217.2 0.0037 ----------------------------------------------------------------------------------------------Total 0.5358 100.0000 21217.2
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- 2019-08-22 14:40:20離子色譜儀對污廢水中多聚磷酸鹽的測定
- 對多聚磷酸鹽的分析如P2O74-,P3O105-,一般是先將其轉化為PO43-用光度法測定總磷,此法不僅要作樣品前處理,而且不能進行形態分離。用離子色譜法,陰離子交換分離;氧化鈉淋洗液和甲醇有機改進劑,梯度淋洗分離多聚磷酸鹽(正磷酸鹽PO43-、焦磷酸鹽P2O74-、三聚磷酸鹽P3O105-),化學YZ電導檢測的Z低檢出限達到15~50微克/升。下圖B為同時分離5種磷酸鹽的標準色譜圖。另外，使用疏水性非常低的陰離子分離柱分離多聚磷酸鹽有了新的進展。一次進樣可同時測定正、焦、三聚和四聚磷酸鹽。
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- 2019-07-24 16:44:37化學添加劑有機磷和多聚磷酸鹽的標準離子色譜圖
- 對多聚磷酸鹽的分析如P2O74-,P3O105-,通常是先將其轉換為PO43-用光度法分析總磷,此法不但需作試樣前處理,并且不可以開展形態分離。用離子色譜法,陰離子交換分離;氧化鈉淋洗液和甲醇有機改進劑,梯度淋洗分離多聚磷酸鹽(正聚磷酸鹽PO43-、焦磷酸鹽P2O74-、三聚磷酸鹽P3O105-),化學YZ電導檢測的低檢出限達到15~50微克/升。下圖B為同一時間分離5種聚磷酸鹽的標準色譜圖。 有機磷和多聚磷酸鹽是常見的化學添加劑。因為Ca2+,Mg2+與多聚磷酸鹽有很強的絡合能力,因而工業生產中普遍用多聚磷酸鹽作為循環系統水中的阻垢劑和防蝕劑;日用品化學品如洗潔劑、牙青等添加多聚磷酸鹽以軟化水硬度。大批的聚磷酸鹽排入水體中易造成水質的富營養化,可使水中水生植物大批繁衍,耗費氧分,造成水生動物的死亡。 此外，采用疏水性比較低的陰離子分離柱分離多聚磷酸鹽有了新的突破。一次進樣可同一時間分析正、焦、三聚和四聚磷酸鹽。 現階段，很多西方國家已明令禁止采用多聚磷酸鹽做化學添加劑。離子色譜儀可用以污廢水中多聚磷酸鹽的分析。下圖A為聚磷酸鹽的化學結構。（來源：青島普仁儀器有限公司）
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滬公網安備 31011502008050號