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日本 Nikon 尼康 超分辨率顯微鏡系統(tǒng) N-SIM E

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產(chǎn)品特點

N-SIM E運用結(jié)構(gòu)照明顯微鏡技術(shù),實現(xiàn)了2倍于傳統(tǒng)光學顯微鏡的空間分辨率(約115NM)。作為一套精簡、經(jīng)濟的超分辨率系統(tǒng),N-SIM E支持常用的激發(fā)波長和基本的成像模式,是個人實驗室的理想選擇。

詳細介紹

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分辨率媲美N-SIM的個人超分辨率顯微鏡

 N-SIM E運用結(jié)構(gòu)照明顯微鏡技術(shù),實現(xiàn)了2倍于傳統(tǒng)光學顯微鏡的空間分辨率(約115nm)。作為一套精簡、經(jīng)濟的超分辨率系統(tǒng),N-SIM E支持常用的激發(fā)波長和基本的成像模式,是個人實驗室的理想選擇。 

 

兩倍于傳統(tǒng)光學顯微鏡的高分辨率

 N-SIM E 結(jié)合結(jié)構(gòu)照明顯微技術(shù),并搭配尼康知名的CFI超分辨率復消色差TIRF 100x油鏡(NA 1.49),將空間分辨率提升至傳統(tǒng)光學顯微鏡的近2倍(約115nm),可以觀察細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的微小細節(jié)以及它們之間的相互作用。

*488nm激光激發(fā),3D-SIM模式

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超分辨率成像(Slice 3D SIM 模式)     傳統(tǒng)寬場成像

YFP標記的B16黑色素瘤細胞微管

物鏡:CFI 復消色差TIRF 100x 油鏡(NA 1.49

成像速度:約1.8/幀(動態(tài))

圖片由日本理化研究所定量生物學中心,細胞極性調(diào)控實驗室,Yasushi Okada博士提供。

  
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超分辨成像(Slice 3D SIM 模式)      傳統(tǒng)寬場成像

 

GFP標記的活體HeLa細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

物鏡:CFI 復消色差TIRF 100x 油鏡(NA 1.49

成像速度:約1.5/幀(動態(tài))

圖片由福島醫(yī)科大學醫(yī)學院,生物醫(yī)學研究所,Ikuo Wada博士合作拍攝。

 1/秒的時間分辨率,快速超分辨率成像

N-SIM E實現(xiàn)高速超分辨圖像獲取,時間分辨率約1/幀,支持活細胞高分辨成像。

 3D-SIM模式提供Z軸超高分辨率成像

Slice 3D SIM模式用于300nmZ軸分辨率的光學斷層超分辨率成像。Stack 3D-SIM模式(選配)用于厚樣品的多層序列超分辨率成像,具有比Slice 3D-SIM模式更高的成像對比度。

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超分辨成像(Slice 3D SIM 模式)     傳統(tǒng)寬場成像

尼羅紅標記的枯草芽孢桿菌細胞膜(紅色),和GFP標記的細胞分裂蛋白DivIVA(綠色)。超分辨率顯微鏡可以精確定位細胞分裂過程中的相關(guān)蛋白。

圖片由紐卡斯爾大學細菌細胞生物學中心, Henrik Strahl博士和 Leendert Hamoen 博士提供。 

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   Stack 3D SIM 模式(立體視圖)                       Stack 3D SIM模式(最大投射)

Alexa Fluor 488標記小鼠角質(zhì)細胞中的角蛋白中間纖維。

圖片由德國亞琛工業(yè)大學,Reinhard Windoffer博士提供。 

 3激光多色超高分辨率成像

 N-SIM E專用的緊湊型LU-N3-SIM 激光臺,預裝了最常用的3個激光器(488/561/640),可進行多色超分辨率成像。用于研究細胞水平多個蛋白間相互作用以及動態(tài)過程。 

 ? 結(jié)構(gòu)照明顯微鏡原理   

通過對覆蓋已知高空間頻率圖案所產(chǎn)生的莫爾紋進行分析處理,可從數(shù)學上恢復標本的亞分辨結(jié)構(gòu)。

使用高空間頻率的激光干涉照明標本,標本內(nèi)的亞分辨結(jié)構(gòu)產(chǎn)生莫爾條紋,這些莫爾條紋中包含標本經(jīng)過調(diào)制的亞分辨率結(jié)構(gòu)信息。捕獲莫爾條紋并通過影像技術(shù)進行處理,可復原未知的樣品信息,實現(xiàn)超越傳統(tǒng)光學顯微鏡極限的卓越分辨率。

image.png                                                                                                                  條紋圖案照明輻射配合一直的空間頻率,能夠獲取莫爾條紋等細微結(jié)構(gòu)的信息。

通過處理多個莫爾條紋影像創(chuàng)建超分辨率影像

  在此處理過程中,捕獲3道德莫爾條紋影像包含標本內(nèi)微小結(jié)構(gòu)的信息。顯微鏡對結(jié)構(gòu)照明的多個相位和方向進行捕捉,并從莫爾條紋信息中提取出“超分辨率”信息。然后顯微鏡將此信息以數(shù)學方式組合到“傅立葉”或孔徑空間中,接著將其轉(zhuǎn)換回影像孔徑,從而產(chǎn)生分辨率兩倍于傳統(tǒng)顯微鏡的影像。

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 使用高頻條紋照明使分辨率翻倍

 高分辨率、高空間頻率信息的捕捉收到物鏡數(shù)值孔徑(NA)的限制,且超過光學系統(tǒng)孔徑的結(jié)構(gòu)孔徑頻率被去除(圖A)。

 通過高頻結(jié)構(gòu)化照明技術(shù)提高樣本亮度,超越傳統(tǒng)的分辨率限制,令樣本中的未知結(jié)構(gòu)清晰可見,在光學系統(tǒng)光圈內(nèi)轉(zhuǎn)顯微鏡不為人知的超分辨率信息(圖B)。

 然后此超分辨率信息以數(shù)學形式與物鏡捕捉到的標準信息組合在一起,從而使得NA和光學系統(tǒng)的分辨率有效翻倍(圖C)。

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A:分辨率受到物鏡NA的限制

B:結(jié)構(gòu)照明和標本中物鏡無法分辨出的細微結(jié)構(gòu)共同作用,產(chǎn)生莫爾條紋

C:捕捉到約為NA角度兩倍角度的射線 

  超分辨率顯微鏡專用物鏡  

可配置100x60x超分辨率專用物鏡,其中100x油鏡適用于固定標本的拍攝,而60x水鏡更適合活細胞長時間成像。

 超分辨率物鏡針對尼康超分辨率顯微鏡設(shè)計研發(fā),具有極`佳的光學表現(xiàn)。每顆物鏡均經(jīng)過嚴格的檢查和挑選,具有zuidi的光學相差,確保優(yōu)異的光學性能。

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CFI SR Plan Apochromat IR 60x WI                                      CFI SR Apochromat TIRF 100x oil

 


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