一、深圳艾瑞斯生產的金霉素快速檢測試劑盒概要金霉素是以四并苯為母核的一族抗生素，其中四環素、土霉素、金霉素及多西環素以其優良的抗性、穩定的藥性及低廉的價格，在畜牧業生產中廣泛用于疾病的和預防及促進生長。但該類藥物過量使用會導致畜產品中高濃度藥物殘留，直接影響消費者身體健康。高效液相色譜法目前是分析四環素類藥物殘留量的主要方法，但需要一系列繁瑣的提取和凈化處理步驟，而且存在回收率低，雜質干擾大等問題。本試劑盒是應用ELISA技術研發而成的檢測產品，能減少操作誤差和工作強度。

二、金霉素快速檢測試劑盒原理

金霉素檢測試劑采用間接競爭ELISA方法檢測組織、蜂蜜、雞蛋等樣本中的金霉素類藥物，試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的金霉素類藥物和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗金霉素類藥物抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含金霉素藥物含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中金霉素類藥物的殘留量。

三、適用范圍

金霉素檢測試劑盒可定量、定性檢測組織、蜂蜜等樣本中金霉素的藥殘留量。

四、技術指標

1 試劑盒靈敏度：0.05ppb(ng/ml)

2 反應模式：37℃，30min～30min～15min。

3 檢測下限：

組織樣本（雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚、雞蛋）：0.3ppb  蜂蜜樣本：2ppb

4 交叉反應率：

金霉素：100%

5 樣本回收率：

組織（雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚）:85±20% 蜂     蜜：75±20%

五、試劑盒組成

酶標板、標準液（6個）、高標準液、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液

六、貯藏條件及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。

保 質 期：該產品有效期為1年，生產日期見包裝盒。

?酶聯免疫試驗步驟

將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

實驗開始前需配制標準品應用液；低濃度的標準品不穩定，需現配現用。

在0ppb的瓶中加復溶液3ml，0.2ppb、0.6ppb、1.8ppb、5.4ppb的瓶中分別加復溶液2ml，16.2ppb的瓶中加復溶液3ml。

標準液6：取1.0ppm高濃度標準品溶液48.6ul加入裝有3ml 復溶液16.2ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為16.2ppb。

標準液5：取1ml標準液6加入裝有2ml 復溶液5.4ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為5.4ppb。

標準液4：取1ml標準液5加入裝有2ml 復溶液1.8ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為1.8ppb。

標準液3：取1ml標準液4加入裝有2ml 復溶液0.6ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為0.6ppb。

標準液2：取1ml標準液3加入裝有2ml 復溶液0.2ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為0.2ppb。

標準液1：直接使用復溶液，濃度即為0ppb。

1 編    號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

2 加樣反應：加標準品應用液或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50μl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光反應30min。

3 洗    滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，一次拍干。（用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

4 加酶反應：加酶標記物100μl/孔，37℃避光反應30min。

5 洗    滌：同上

6 顯    色：加底物液A 50μl/孔，再加底物液B 50μl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光顯色15min（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。

7 終    止：加終止液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，終止反應。

8 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10min內完成。