Galectin-1,半乳糖凝集素家族成員之一。半乳糖凝集素在細胞內和分泌后的許多系統中發揮作用,含有一個或兩個碳水化合物識別結構域(CRR),其介導對含N-乙酰氨基半乳糖的糖蛋白的識別。Galectin-1可正向或負向調節細胞生長和增殖,通過誘導Th2型細胞因子和抑制促炎細胞因子的產生來調節細胞因子的分泌。Galectin-1還可以調節細胞-細胞以及細胞-基質的相互作用,促進細胞附著或分離。此外,Galectin-1在免疫抑制和抗炎特性中也發揮重要作用。
翌圣Human Galectin-1 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養上清中的Galectin-1。特異性抗Galectin-1抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本,經過孵育,樣本中存在的Galectin-1與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后,加入檢測抗體孵育結合,經洗滌,再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中Galectin-1的濃度成正比。加入終止液終止反應,在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
貨號 |
97020ES48 / 97020ES96 |
規格 |
48 T / 96 T |
檢測范圍 |
0.31-20 ng/mL |
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
檢測時長 |
4.5小時 |
靈敏度 |
0.08 ng/mL |
稀釋線性 |
76 - 120% |
回收率 |
84 - 123% |
板內差 |
5.7% |
板間差 |
8.1% |
數據擬合繪制標準曲線,生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
濃度(ng/mL) |
顯色值 |
平均值 |
校準值 |
|
20 |
2.726 |
2.682 |
2.704 |
2.709 |
10 |
2.082 |
1.916 |
1.999 |
1.981 |
5 |
1.327 |
1.202 |
1.264 |
1.291 |
2.5 |
0.824 |
0.742 |
0.783 |
0.766 |
1.25 |
0.438 |
0.404 |
0.421 |
0.427 |
0.63 |
0.240 |
0.243 |
0.241 |
0.234 |
0.31 |
0.123 |
0.125 |
0.124 |
0.127 |
0 |
0.015 |
0.016 |
0.016 |
/ |
Galectin-1的最低檢測限為0.08 ng/mL,通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定6次,評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測22次,評估酶標板間的精密度。
項目 |
板內精密度 |
板間精密度 |
||||
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
平均值 |
9.00 |
2.22 |
0.64 |
9.03 |
2.29 |
0.65 |
標準差 |
0.58 |
0.11 |
0.04 |
0.90 |
0.16 |
0.05 |
變異系數(%) |
6.48 |
4.92 |
5.66 |
10.00 |
6.91 |
7.50 |
通過不同水平的Galectin-1添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍(%) |
血清 |
101.3 |
89.4-123.2 |
血漿 |
101.0 |
84.0-118.9 |
細胞培養上清 |
100.6 |
95.2-110.8 |
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
94.0 |
84.1-107.8 |
1:04 |
107.2 |
98.2-115.9 |
1:08 |
104.4 |
98.1-115.9 |
1:16 |
109.1 |
98.9-119.9 |
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
92.2 |
76.4-100.6 |
1:04 |
99.2 |
98.0-99.8 |
1:08 |
101.3 |
100.5-101.9 |
1:16 |
107.7 |
92.2-118.1 |
細胞培養上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍(%) |
1:02 |
84.7 |
78.9-88.8 |
1:04 |
95.5 |
88.6-102.3 |
1:08 |
99.5 |
98.5-100.6 |
1:16 |
100.2 |
94.1-106.9 |
應用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 |
樣本數目 |
平均值(ng/mL) |
樣本值(ng/mL) |
血清 |
8 |
0.36 |
n.d-2.08 |
血漿 |
6 |
0.51 |
n.d-1.28 |
細胞培養上清 |
4 |
0.35 |
n.d-0.7 |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得0.31 ng/mL
本試劑盒識別天然和重組Galectin-1,沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: |
Galectin-2 |
Galectin-3 |
Galectin-4 |
Galectin-7 |
Galectin-8 |
Fibronectin |
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器,按時校準,仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 |
||
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規范操作 |
|
CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產品組分表進行保存。 |
報價:面議
已咨詢40次抗體
報價:¥1
已咨詢482次ELISA試劑盒
報價:¥1
已咨詢512次ELISA試劑盒
報價:¥1
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報價:面議
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