單鍵合環糊精手性色譜柱操作說明書

1.使用前注意事項

 1）出廠的色譜柱保存在異丙醇中,進樣前建議用流動相低流速（建議0.5 mL/min）沖洗一個小時；

 2） 色譜柱可適用于正相模式、反相模式和極性有機模式，在不同的模式轉化之前請使用異丙醇過渡（＜0.3 mL/min），過渡體積不小于20 mL。

2.參考操作條件

3、流動相

3.1正相流動相

1) 表格中烷烴為正己烷，異己烷或正戊烷；

2) 流動相中醇的洗脫能力一般甲醇>乙醇>異丙醇，且隨著流動相中醇的含量提高，樣品峰的保留時間縮短；

3) 甲醇在烷烴中的溶解性不好，正己烷中甲醇的最大含量是5％。如果要在烷烴中使用甲醇，建議同時加入一定量的乙醇；

4) 色譜柱能使用100％的甲醇或乙腈，如果要將正己烷換成甲醇或乙腈，或者要換成不同 的極性溶劑，強烈建議使用100％的異丙醇作為過渡溶劑，過渡流速小一些（異丙醇粘度較大）；

5) 如果待分析樣品為酸性(堿性)化合物,  往往要在流動相中使用酸性(堿性)添加劑。對于堿性化合物建議在流動相中加入堿性添加劑，如二乙胺，三乙胺，乙醇胺等；而酸性化合物，一般加入有機酸，如三氟乙酸，乙酸，甲酸等。有機酸或有機堿的加入量一般為 0.1％,  不宜超過 0.5％.

3.2反相流動相

1) 反相流動相一般使用甲醇/水、乙腈/水，流動相允許的最高有機相比例為100％，最高的水相比例為60％；

2) 當需要使用緩沖溶液時，緩沖液的濃度不宜太高，有機和無機的緩沖溶液濃度分別不能超過0.5％和0.3％；

3) 色譜柱可承受的緩沖溶液PH范圍為3.0-7.5，超過該范圍時會降低色譜柱的壽命。

4、色譜柱保養

1) 強烈建議使用保護柱；

2) 必須使用色譜純試劑配制流動相，使用前需經0.45 μm濾膜過濾和超聲 脫氣處理；

3) 在進樣前需過濾樣品溶液；

4) 在使用含酸/堿添加劑的正相流動相后，需使用異丙醇或乙醇沖洗色譜柱(長柱 ≥40 mL，短柱≥ 30 mL)后封存；

5) 在使用含酸、堿或鹽的反相流動相后，應立即使用不少于40 mL甲醇-水 或乙腈-水溶液(70/30，V/V)沖洗色譜柱，然后用甲醇封存；若流動相中不含酸、堿或鹽等，直接用甲醇封存；

  6）建議不要長期在極端條件下使用色譜柱，以避免色譜柱使用壽命變短。